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霉茶总黄酮的降压机制研究-神经内科护士论文

时间:2012-06-27 11:13来源:作者:点击:
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  霉茶总黄酮的体内药物代谢符合一室模型。药物在高、中、低剂量时的药物浓度变化比较一致。整个药物的体内代谢符合一室模型,且药物均有一定的肝肠循环,在体内的生物半衰期时间为4.5~5.5 h左右,血药浓度较快到达最大值,但是会持续一个时间段,可能与蛇葡萄素的结构有相关性。
  1   材料与仪器
  1.1  药品与试剂
  霉茶总黄酮、蛇葡萄素对照品(自制),乙腈(色谱纯),霉茶总黄酮用4% CMC-Na溶液加热溶解成所需浓度。
  1.2  动物
  SD大鼠,体重200~250 g,雌雄各半,由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供,许可证号:SCXY(鄂)2004-00070。室温18~20℃,实验期间饲以该中心提供的固体饲料,自由饮水。
  1.3 仪器
  LG16-W型离心机(北京医用离心机厂);XW-80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);Agilent-1100系列高效液相色谱仪(四元泵)、紫外检测器及配套色谱工作站;Mettler-Toledo AG285型分析天平。
  2 方法
  2.1 色谱条件
  色谱柱为Aichrom Bond-AQ C18(5 μm,4.6 mm×250 mm); YWG-C18 保护柱,检测波长为292 nm,流动相为乙腈-0.2%磷酸水(25∶75),流速为1.0 ml·min-1;柱温:30℃;进样量:5 μl。
  2.2 血液样品的制备与处理[2]
  取36只大鼠,禁食过夜,随机分为霉茶总黄酮高、中、低3个剂量组(灌胃剂量分别为:360,180,90 mg·kg-1),每只大鼠取6个时间点、3个平行,单次灌胃给药后分别于0.5,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,10.0,12.0 h眶静脉取血0.5 ml,4 000 r·min-1离心10 min,分离出血浆,定量吸取血浆0.2 ml,加0.6 ml乙腈沉淀蛋白,涡流混旋10 min,4 000 r·min-1离心10 min,取上清液,滤膜滤过(0.45 μm),进样5 μl,以峰面积进行定量。
  2.3 对照品系列溶液的制备
  分别精密称取蛇葡萄素对照品适量,以甲醇溶解并稀释至刻度配制成不同浓度的对照品储备液(1 200,800,600,400,200 μg·ml-1),4℃保存备用。精密吸取蛇葡萄素对照品储备液适量,加甲醇定容,梯度稀释为800,200,120,80,40,8,4 μg·ml-1的对照品溶液。
  2.4 对照品系列模拟血浆样品的制备
  分别精密吸取上述稀释的系列对照品溶液各0.1 ml,然后用大鼠空白血浆分别定容至1 ml,使血浆浓度分别为80,20,12,8,4,0.8,0.4μg·ml-1的对照品溶液。
  2.5 数据处理 药物代谢动力学参数由MCPKP软件计算[3]。
  3  结果
  按照含药对照品系列溶液配制方法,配制不同浓度的血浆对照品溶液,依次为12,8,4μg·ml-1。然后按照“2.2”项下同法操作,精密进样5 μl,记录蛇葡萄素的峰面积。按照外标法,代入线性方程计算蛇葡萄素的血浆药物浓度,计算所得浓度与实际浓度的比值,并计算日内精密度。方法的回收率分别为:91.83%,93.75%,86.25%,日内精密度为:7.56%,6.40%,5.68%。连续3 d测定上述浓度样品,结果日间精密度为:8.02%,7.08%,6.72%。符合生物样品中药物定量分析研究的方法学要求。霉茶总黄酮高、中、低剂量组大鼠体内的蛇葡萄素血药浓度均在1.5~2.5 h达高峰,2.5 h后开始下降。血药浓度-时间数据由MCPKP软件处理,各项动力学参数见表1,血药浓度变化见图1。
       
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