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1  仪器与材料
　　1.1  仪器与试剂RPMI 1640培养液：美国GIBCO公司产品；胎牛血清（FBS）：杭州四季青生物工程有限公司产品； 溴化二甲噻唑二苯四氮唑 （MTT）、胰蛋白酶和二甲基亚砜（DMSO）为AMRESCO公司产品；其余试剂均为国产分析纯（国药集团）。倒置荧光显微镜（IX-71）：日本OLYMPUS产品；二氧化碳培养箱（Thermo Forma Series-II，美国 Thermo Scientific，Forma公司）产品；全自动酶标仪（Multiscan Mk3, labsystems公司）产品。
　　1.2  材料新鲜马齿苋Portulaca oleracea L.于2005-09购于江西省南昌市农贸市场，经本校药学院药理学教研室鉴定。用清水洗净，沥干水分，60℃鼓风干燥6 h，粉碎备用。称取上述备用马齿苋干粉50 g，加蒸馏水（按1∶30的比例分3次加蒸馏水），煮沸后煎20 min，取其上清液减压浓缩使其生药浓度为2 g/L，得粗提取液，置4℃冰箱保存备用。同时，称取相同重量的马齿苋干粉，分别采用周晶［4］、上官新晨［5］、黄阿根［6］等的方法提取马齿苋粗多糖、不饱和脂肪酸、生物碱、黄酮及定量，所得样品4℃干燥保存备用。临用时配制使用。
　　2  方法
　　2.1  细胞株及体外抑瘤作用观察
　　2.1.1  肿瘤株选用人肺腺癌细胞（A-549 cell）和人宫颈癌细胞（Hela cell） 由南昌大学医学院第二附属医院细胞研究室友情提供，人喉表皮样癌细胞（Hep-2 cell）和人恶性胚胎横纹肌瘤细胞（RD cell）由江西省疾控中心友情提供。
　　2.1.2  马齿苋活性成分对A-549 细胞生存能力的影响选对数生长期的A-549细胞，用0.25％胰蛋白酶消化后，用含10％FBS的RPMI1640培养液制成5×104个细胞/ ml，接种于96孔板中培养24 h后， 吸去上清液。阴性对照组加入同体积的未添加马齿苋活性成分的培养液；实验组分别加入含有终浓度为10， 50， 100， 200 μg/m1的总提取液、多糖、不饱和脂肪酸、生物碱、黄酮的培养液处理4 h后，更换培养液继续培养24 h，采用MTT法间接测定癌细胞生存能力［7］，按公式计算其抑瘤率。抑瘤率（％）=［（对照组A值一实验组A值）／对照组A值］×100%。
　　2.1.3  马齿苋活性成分对Hep-2细胞、Hela细胞和RD细胞的作用实验方法与“2.1.2”项基本相同，不同之处是：取指数生长期的Hep-2 cell、RDcell和Hela cell，用含10% FBS的DMEM培养液配制成1×105个细胞/ml悬液，接种于96孔板中，随后的处理同“2.1.2”项。
　　2.2  实验动物及体内抑瘤作用观察
　　2.2.1  实验动物及瘤株昆明种小鼠，雌雄各半，5周龄，体质量19～23 g，由江西省医学实验动物中心提供（合格证号：021-97-03），一级动物。实验小鼠肉瘤S180腹水型瘤株由江西省医学实验动物中心提供。
　　2.2.2  小鼠S180实体瘤模型建立与分组S180肉瘤细胞接种选择接种S180细胞后1周的小鼠脱颈椎处死，无菌条件下抽取腹水，用生理盐水调节细胞浓度至1×107 个细胞/ml。以每只小鼠0.2 ml接种于小鼠右腋下皮下。将动物随机分为6组，每组6只，其中一组为阴性对照组，其余5组为实验组。
　　2.2.3  马齿苋活性成分对小鼠S180移植性实体瘤的影响阴性对照组每日腹腔给予等量的生理盐水（0.2 ml/d），实验组分别每日腹腔给予100 mg/kg·b.w.的马齿苋总提取液、多糖、总黄酮、生物碱和不饱和脂肪酸。接种肿瘤24 h 后给药，连续14 d，分别于实验开始和实验结束时称小鼠体重并记录。实验结束后，脱颈椎处死小鼠剥离肿块，称瘤重，并计算肿瘤生长抑制率。
　　2.3  统计学处理实验结果以±s表示，计量资料用方差分析法分析，用t检验统计处理。P<0.05被认为两变量之间有统计学显着性差异。
　　3  结果
　　终浓度为100 μg/ml和200 μg/ml的马齿苋生物碱对A549肺癌细胞的增殖具有明显抑制作用，抑制率分别为15%和28%，与对照组相比均有显着性差异，呈现浓度依存性抑制关系。马齿苋总成分、多糖、脂肪酸和黄酮各剂量组对A549细胞无明显的抑制作用。马齿苋黄酮对RD细胞体外增殖有很强的抑制作用，其抑癌效果与剂量呈正相关，在终浓度达200 μg/ml时，抑制率达50%。但马齿苋总成分、多糖、脂肪酸和生物碱对RD细胞没有显着抑制作用。
　　马齿苋活性成分对小鼠S180移植性实体瘤的影响由表5可以看出，各活性成分对肉瘤均有一定的抑制作用，各成分处理组小鼠平均瘤重均明显低于对照组（P<0.01，P<0.001），其中黄酮抑制作用最强，达38%。同时，荷瘤小鼠的死亡率得到明显抑制，生理盐水处理组小鼠在实验结束时小鼠死亡率为50%，马齿苋生物碱、黄酮、多糖、脂肪酸和总成分提取液处理组小鼠15 d后的死亡率分别为0，16.7%，16.7%，33.3%和33.3%（见表5）。整个实验过程中不伴有体质量降低或其它副作用现象出现。