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妊娠期免疫因子系统的研究-广西预防医学怎么投稿

时间:2012-06-27 11:13来源:作者:点击:
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  近年来Toll样受体在母-胎界面的表达及免疫功能研究备受关注。研究表明,TLR1-10的mRNA及蛋白在滋养细胞和晚孕胎盘中都有表达,同时其相关分子和共受体CD14、MD2、MyD88也有表达。Toll样受体通过识别配体,从而产生效应,其中TLR3识别的配体是病毒双链RNA。目前有关TLR3在妊娠中的研究有:(1)国内外许多试验研究发现,腹腔注射大剂量PolyI:C的小鼠流产率和胚胎吸收率增加,滋养细胞的TLR3被配体PolyI:C激活后,细胞内IL-2增加,IL-10减少;而且巨噬细胞、NK细胞毒性增加。普遍认为,IL-10是维持妊娠的重要因子,而IL-2是已知的致流产剂。(2)Masuhiro和Shinsaku[6]检测了10种人类TLR和21种TLR相关基因分布情况,发现绒毛及胎盘组织中,TLR3水平居于最高(以早孕滋养细胞最突出),该研究采用组织提取RNA方法,对胎盘TLR3细胞定位未能提供进一步研究。
  正常妊娠时母-胎界面存在着很强的免疫反应,其主要作用是促进胚胎植入和调节胎盘的发育,使母体对半异体来源的胎儿、胎盘产生耐受;同时,维持宿主防御反应,从而阻止病原微生物对机体组织和妊娠的破坏。  母胎界面处的滋养细胞、免疫活性细胞及细胞因子,构成了母-胎界面的免疫微环境,对于妊娠的建立、维持、胎儿的生长发育以及分娩发动起着重要作用[1]。而妊娠病理(如:反复自发性流产、早产、子痫、胎膜早破、IUGR等)则与母-胎界面的免疫微环境的改变有关[2]。因此,母-胎界面处细胞生物学和分子免疫学的研究已成为医学研究的热点之一。
  天然免疫性细胞是可以通过对病原体表达的病原体相关分子模式识别各种病原体的。Toll样受体是近年来发现的重要的免疫受体,它在天然免疫中通过对病原体相关的分子模式(PAMP)的识别发挥作用,通过刺激信号的级联反应导致细胞因子的产生和协同刺激因子的表达,从而在天然免疫和获得性免疫中起到了桥梁的作用[3]。近年来的研究进展还发现Toll样受体也广泛表达于女性生殖系统及母-胎界面,在局部抗感染、生殖免疫、妊娠免疫的生理及病理过程中发挥着重要作用[4,5]。
  本试验进行了Toll样受体其中之一TLR3在母-胎界面的重要细胞人早孕绒毛膜外滋养细胞株的表达及影响的研究。检测了人早孕绒毛膜外滋养细胞株TLR3 mRNA及蛋白的表达,并且通过免疫细胞化学显示了TLR3蛋白定位(细胞浆);还检测了Poly(I:C) (聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸;简称聚肌胞,是一种人工合成的双链RNA)刺激后TLR3 mRNA及蛋白的表达的调节作用。TLR3 mRNA的表达随刺激时间及剂量的梯度的上升而增加,与刺激前比较差异有显着性。流式细胞仪检测TLR3蛋白的表达,平均荧光强度随刺激时间及剂量的梯度的上升而增加,与刺激前比较差异有显着性;而荧光阳性细胞数刺激12h与刺激前比较差异无显着性;刺激24h、48h随刺激时间及剂量梯度的上升而增加,差异有显着性。说明了TEV-1 细胞株TLR3的mRNA及蛋白的表达与Poly(I:C)刺激时间及剂量呈正相关。但是荧光阳性细胞数刺激12h与刺激前比较差异无显着性,说明不同水平检测TLR3表达的灵敏度不同,或者可能是蛋白的表达滞后于mRNA的表达造成的。
  母-胎界面的Toll样受体被激活后,通过MyD88依赖或非依赖途径及核转录因子κB、JNK 等多条信号途径活化细胞,从而产生多种细胞因子及炎性趋化因子[7]:如IL-6、IL-8、GRO-a、MCP-1、MCP-1a、RANTES,这些细胞因子与白细胞的游走及机体防御有关。其中的趋化因子不仅便利了免疫细胞在蜕膜中的募集来保护机体和正常妊娠(例如:蜕膜中的巨噬细胞、中性粒细胞可以吞噬凋亡的滋养细胞),而且被认为为正常的妊娠提供了免疫方面的支持。在胚胎种植期,胚胎附着、粘连所必需的整合素和粘连蛋白可能依赖于Toll样受体激活后产生的前炎症因子的分泌[8]。Toll样受体被激活后,可以直接激活凋亡级联反应酶caspase或产生TNF-α和IFN-γ等细胞因子诱发细胞的凋亡。绒毛滋养细胞的凋亡是正常妊娠的生理现象,大量形态学研究发现正常妊娠期伴随着绒毛滋养细胞的凋亡与分化,说明其凋亡与胎盘的形成、重塑相关。凋亡不仅可以去除衰老的合体滋养细胞,还能促进细胞滋养细胞融合而形成合体滋养细胞。Toll样受体不但参与妊娠的生理过程,也与妊娠病理相关。很多研究发现,妊娠相关疾病,如早产、子痫、IUGR、胎膜早破、反复自发性流产都与感染及Toll样受体诱导的滋养细胞的过度凋亡密切相关。已经观察到,患羊膜炎及早产妇女的滋养细胞TLR-2或(和)TLR-3表达增高,而子痫前期患者的滋养细胞TLR-4表达增高。在妊娠相关疾病病例中,蜕膜组织中的巨噬细胞、中性粒细胞、NK细胞显着增高,而且其分布也发生改变[9]。这些改变了的免疫细胞的反应可能严重地破坏了正常的妊娠。TLRs可能作为“危险信号”与妊娠相关疾病的桥梁,诱发免疫反应,导致滋养细胞过度凋亡[10]。
       
  
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