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　　苦丁茶的原植物来源较为复杂,据调查,全国共有5科(木樨科、冬青科、金丝桃科、紫草科、马鞭草科)16变种[2],目前对冬青科冬青属苦丁茶已建立了较为完善的质量控制体系,而对木樨科女贞属苦丁茶研究较少,对其化学成分所知仍不全面。本试验只是对其主要化学成分槲皮素进行含量测定以建立质量标准,其他成分有待于进一步研究。
　　1  仪器与试药
　　样品药材由山西省中医药研究院中药房提供,经鉴定为木樨科女贞属变紫女贞的干燥叶。槲皮素对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号081-9304)。Agilent 1100高效液相色谱仪。甲醇为色谱纯,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯。
　　2  方法与结果
　　2.1  色谱条件与系统适用性试验
　　色谱柱为Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5 μm)；甲醇-0.4%磷酸(47∶53)为流动相；检测波长360 nm,柱温30 ℃,理论塔板数按槲皮素峰计算应不低于4 000。色谱图见图1。
　　2.2  供试品溶液的制备
　　取本品粉末(过3号筛)约1.0 g, 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加80%甲醇25 mL,密塞,称定重量,加热回流1 h,放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10 mL,加入盐酸1 mL,置90 ℃水浴锅中加热回流1 h,取出,立即冷却,转移至25 mL量瓶中,加80%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
　　2.3  对照品溶液的制备
　　精密称取槲皮素对照品2.52 mg,置50 mL量瓶中,加80%甲醇至刻度,摇匀,即得每1 mL含50.4 μg的溶液。
　　2.4精密度试验
　　精密吸取槲皮素对照品溶液(50.4 μg/mL)10 μL,重复进样5次,结果峰面积的平均值为1840.8,RSD＝0.86%。取同一供试品溶液,在0、2、4、6、8 h分别进样10 μL,测得样品中槲皮素峰面积值RSD＝1.91%,结果表明,供试品溶液在8 h内稳定性良好。按拟定的含量测定方法,对同一批样品分别制备5份供试品溶液,精密吸取10 μL,进样,测得槲皮素的平均含量为0.408 6 mg/g,RSD＝2.86%。结果表明,本法重复性较好。取已测知含量样品0.5 g,研细,精密称取5份,精密加入槲皮素对照品0.20 mg,按《中华人民共和国药典》“含量测定”[1]项下方法测定,计算回收率,结果见表1。 表1  加样回收率试验结果（略）
　　在流动相的选择中,试验了甲醇-0.4%磷酸(47∶53)、甲醇-0.4%磷酸(50∶50)等不同流动相系统,结果采用甲醇- 0.4%磷酸(47∶53)为流动相时,不仅分离情况好,而且保留时间短。在供试品溶液制备方法选择中,分别考察了80%甲醇、甲醇、乙醇3种不同提取溶剂,结果选择80%甲醇为提取溶剂,回流提取1 h,对苦丁茶中槲皮素提取效果好而且方法的精密度、回收率等均可以达到测定标准。