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不同产地蜂房抗炎活性的比较-医学专业论文

时间:2012-06-27 11:13来源:作者:点击:
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  蜂房为胡蜂科昆虫果马蜂 、日本长脚胡蜂 或异腹胡蜂的巢。2005年版《中国药典》中记载蜂房具有“祛风,攻毒,杀虫,止痛”的作用[1]。《中药大辞典》中记载蜂房药液具有“去腐、生肌、消炎、止痛等作用,并能促进创口早期愈合”[2]。近年来国内多篇文献报道蜂房临床疗效显着,大多数集中于抗肿瘤与抗炎两个方面,已有文献明确指出抗肿瘤物质基础在于它所含有的极性低的脂肪酸类[3],而关于抗炎作用的物质基础研究报道甚少。
  本科室研究发现,蜂房的水煎液具有抗炎活性,而正丁醇提取物抗炎活性明显,主要有效成分为酚酸类和少量的含氮类化合物,但没有进行关于蜂房抗炎成分的质量控制方法的研究。为了进一步对蜂房药材进行科学评价,本研究对16批蜂房药材进行了HPLC比较分析,首次建立了同时测定蜂房药材中主要成分没食子酸、对羟基苯甲酸和原儿茶酸含量的方法[4],为蜂房药材质量控制提供了借鉴。
  检测波长的选择采用Waters二级管阵列检测器对检测波长进行了选择,首先从中选出243,254,261 nm 3个分离度较好的波长,然后进一步通过分析比较这3个波长下的图谱,发现检测波长为254 nm时,3种酚酸均有最大吸收,且色谱峰分离较好,基线较平稳。
  流动相的选择化合物在色谱柱上的保留行为与其化学结构有关,没食子酸、对羟基苯甲酸、原儿茶酸化学结构有着一定差别,对羟基苯甲酸、原儿茶酸保留时间远大于没食子酸,等度洗脱不适宜同时测定这3种成分,故采用梯度洗脱,可缩短分析时间,同时定量3个成分;分别用甲醇-水(加三氟乙酸)、乙腈-水、乙腈-磷酸盐缓冲体系为流动相,以不同梯度进行试验,结果表明用甲醇-水(三氟乙酸调pH至5)线性梯度洗脱效果最好。
  蜂房提取选用传统的水煎醇沉工艺,但要考虑选加水量、煎煮时间、煎煮次数和醇沉浓度的因素,选用L9(34)正交方案,系统考察了4个因素对蜂房提取工艺的影响,选定蜂房最优提取工艺,即每次用20倍量的水煎煮3次,总提取时间为4 h,醇沉浓度为60%。通过对提取溶媒的考察,蜂房水煎液的正丁醇提取物抗炎活性明显;此外,通过对蜂房水煎液正丁醇提取物与水层图谱比较,没食子酸、对羟基苯甲酸和原儿茶酸的峰面积显着提高,杂质明显减少。蜂房水煎液的正丁醇层提取物,不仅有利于3种酚酸类化合物的含量测定,更有利于不同产地蜂房抗炎活性的比较。
  本实验建立了蜂房药材中没食子酸、对羟基苯甲酸和原儿茶酸的含量测定方法,该方法方便、快捷、可靠;结果表明不同产地蜂房中3种酚酸的含量存在一定差异。
         
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