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　　1  仪器与试剂
　　熔点用显微熔点测定仪（X-4数字显示，北京泰克仪器有限公司）（未校正）测定；紫外UV用UV2501（日本岛津）；IR用Thermo Nicolet红外光谱仪（NEXUS470FT—IR）；液质联用仪（Agilent，1100 LC/MSD TRAP SL）；高效液相仪（Agilent，1100 TRAP SL）；制备型高效液相仪（Lab Alliance,YMC HPLC Column），核磁共振仪（AVANCE 500, BRUKER）；柱色谱用硅胶为青岛海洋化工厂产品；聚酰胺，柱层析用100-200目（浙江台州路桥四甲生化塑料厂）；Sephadex LH-20为Pharmacia产品。各种型号常压、加压色谱柱（订制，广西天然药物研究所）；所用试剂为重蒸工业级或分析纯，10％硫酸-乙醇溶液加热显色。脂质过氧化实验用SD大鼠（180～200 g）购于广西医科大学实验用动物中心。样品为战骨干燥茎，2005-07购于广西南宁药材市场，经广西中医学院刘寿养副教授鉴定为马鞭草科豆腐柴属植物黄毛豆腐柴Premna fulva Craib.的茎，样品标本存放于广西大学化学化工学院。
　　2  方法与结果
　　2.1  提取分离战骨的干燥茎（15 kg）经过粉碎后，用70％EtOH 回流提取2次，提取液合并，减压浓缩得浸膏1 500 g。将浸膏溶于水，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取。得到石油醚部分约30 g，醋酸乙酯部分约62 g，正丁醇部分约900 g，取醋酸乙酯部分（20  g）行硅胶柱，用氯仿-甲醇为溶剂系统反复柱色谱分离，并用Sephadex LH-20纯化得化合物1（10 mg），2（8 mg），正丁醇部分（100 g）用聚酰胺柱，乙醇-水溶剂系统梯度洗脱，Sephadex LH-20，制备HPLC纯化得到化合物3（20 mg）。
　　2.2  结构鉴定
　　肝脂质过氧化实验参照文献［9］采用大鼠体外半胱氨酸-铁（FeSO4/Cys模型）诱导的肝线粒体脂质过氧化模型，丙二醛（MDA）是脂质过氧化反应的代谢产物，其产生量的多少反映组织中脂质过氧化程度。考察样品对生成的MDA是否具有抑制作用，即测定添加前后MDA的含量的变化。MDA显色后在532nm波长处有最大吸收，本文以532nm处的吸光度表示MDA的含量。采用抑制率（inhibiting rate，％）表达样品对半胱氨酸-铁诱导的大鼠肝线粒体脂质过氧化的抑制作用。抑制率（%）=（FeSO4/Cys模型组MDA-加样品组MDA）÷FeSO4/Cys模型组MDA × 100％
　　化合物1、2对大鼠肝细胞MDA生成的影响不同浓度的化合物1、2加入组与生理盐水对照组比较，MDA吸光度均有所下降，表明化合物1、2对半胱氨酸-铁诱导的大鼠肝细胞MDA生成具有抑制作用，并且浓度越高，抑制作用越明显，柚皮素和洋芹素的半抑制浓度EC50分别为1.45×10-4mol/L，1.26×10-4mol/L，结果见表1～2。
　　化合物3对大鼠肝细胞MDA生成的影响加入的化合物3在低浓度时，与对照组的MDA吸光度比较变化不大，且无线性关系，说明抗氧化作用不明显；在浓度较高时，MDA吸光度大于对照组，说明脂质过氧化反应加剧，MDA生成增多。
　　对战骨的醋酸乙酯和正丁醇部分进行了化学成分和药理活性的研究，从中分离得到了3种黄酮类化合物，分别鉴定为柚皮素（1），洋芹素（2），芹菜素-6,8-二-C-β-D-葡萄糖苷（3）。它们的结构通过光谱解析，并与相关文献的数据进行比较而确定，其中化合物3首次从该植物中分离得到。在诸多类型天然抗氧化剂中，黄酮类成分能有效减轻细胞的过氧化胁迫，阻止低密度脂质的过氧化，预防和治疗多种疾病而引起众多学者的兴趣。本实验利用大鼠肝脂质过氧化消除实验，对战骨中的黄酮类成分及其抗氧化活性进行了研究。