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1  材料
　　1.1 动物及主要试剂SD♂大鼠，体质量（200±20）g，由广东省卫生厅实验动物中心提供。125I-胃泌素购自中国原子能科学研究院，比活度为1 700 ci/mmol，放化纯度大于95%。胃泌素标准品及链霉蛋白酶由北京鼎国试剂公司提供（Sigma生产）。H+，K+-ATP酶活性测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
　　1.2 主要仪器及设备5500型γ计数器（Beckman），HYS-4多头细胞收集器（上海跃进医疗器械厂），HZS-H恒温水浴振荡器（哈尔滨东联电子有限公司），XDS-1倒置显微镜（重庆光电仪器厂），TDZ5-WS自动平衡离心机（长沙湘仪离心机仪器公司），多头磁力搅拌器（常州国华电器厂）；LDZ5-2低速离心机（北京医用离心机厂）。
　　2 方法
　　2.1 药物、模型的制备及动物分组
　　健脾活血方以四君子汤为主方，配合活血药物而成：党参20 g，白术15 g，茯苓30 g，三七10 g，赤芍20 g，丹参15 g，黄芪30 g，白及30 g等。药材经生药学鉴定，常规水煎2次，浓缩至100%，使每毫升含生药1 g。大鼠胃溃疡模型制备采用乙酸大鼠胃溃疡模型［1］。大鼠造模苏醒后，按完全随机设计法将大鼠分为5组。①正常对照组：10只，系非造模大鼠，喂生理盐水0.09 g／（kg·d）；②模型组：10只，造模3 d开始喂生理盐水0.09 g／（kg·d）；③奥美拉唑组：10只，造模3 d开始喂奥美拉唑2 mg／（kg·d）；④健脾活血组：10只，造模3 d开始喂健脾活血药物1.0 g／（kg·d）；⑤中西治疗组：10只，造模3 d开始喂健脾活血药物1.0 g／（kg·d）+ 奥美拉唑2 mg／（kg·d）。于第22天断头处死。
　　2.2 大鼠胃壁细胞的分离与纯化
　　参照文献建立方法［2］。大鼠脱颈椎处死，剖腹取胃，结扎贲门和幽门。在胃底部做一小切口，用玻璃棒将胃袋翻转，用玻璃片刮下部分胃黏膜作H+，K+-ATP酶活性测定。然后在胃底与胃体之间结扎，弃去胃底，用生理盐水将胃袋冲洗干净。把预先配制好的链酶蛋白酶（Pronase）液约2.5 ml（1 g/L）注入胃袋。然后将胃袋放入预先通氧的A液（NaH2PO4，Na2HPO4，NaHCO3，NaCl，KCl，HEPES，Glucose，BSA，EDTAMA）中，在37 ℃水浴消化30 min后转入B液（NaH2PO4，Na2HPO4，NaHCO3，NaCl，KCl，HEPES，Glucose，BSA，CaCl2，MgCl2）中，用磁力搅拌器搅拌两次，各10 min，收集每次B液中打下的细胞悬液。此过程重复3次。所有收集到的细胞悬液均用200目尼龙网过滤，过滤液4 ℃，1 000 r/min，离心5 min，倾出上清液，沉淀用C液（B液+DTT） 混悬以供纯化。孵育过程皆充以950 ml/L 的O2 +50 ml/L 的CO2。 取10 ml专用离心管，用吸管在管底分别铺2 ml 预先配制好的60%和40% Percoll液制成不连续密度梯度分离液，将细胞悬液1 ml左右铺在最上层，然后4 ℃，2 000 r /min，离心20 min进行纯化，收集40%与60% Percoll交界面处的壁细胞，C液洗两次，再用C液混悬备用。
　　2.3 胃泌素受体测定
　　根据预试（多点饱和实验）确定125I-胃泌素放射配基的近饱和终浓度为100 pmol/L，并以此为基础做单点结合实验，加样顺序如下（表1）。加样后37 ℃孵育30 min，加冰冷的C液720 ml终止反应，迅速用多头细胞收集器收集至玻璃纤维滤膜3次。烘干滤膜后，置于γ计数器测量放射性。特异性结合（SB）=总结合（TB）-非特异性结合（NSB）。以上均各做3个复管。特异结合位点数由以下公式求出： 位点数（单个细胞）=（特异结合×6.022×1023）/（计数效率×2.2×106×放射比活度×放化纯度×109×细胞总数）。
　　2.4  H+，K+-ATP酶活性及胃液总酸度测定
　　用玻璃片刮下胃黏膜放入冻存管内，于-70℃保存待测，用于测定H+，K+-ATP酶活性。将已制备的胃黏膜准确称重后加49倍生理盐水，用组织匀浆机制成2%组织匀浆。按照H+，K+-ATP酶活性测定试剂盒说明进行操作。取胃时将全部胃液抽出置于离心管中离心，3 000 r/min,20 min取上清液，用0.1 mol/L NaOH溶液滴定测量胃液的总酸度。
　　3  结果
　　健脾活血药物对胃溃疡大鼠壁细胞胃泌素受体结合容量的影响 溃疡大鼠壁细胞胃泌素受体结合容量明显低于正常大鼠（P<0.01），奥美拉唑组、健脾活血组及中西治疗组结合位点数明显回升，与溃疡组比较有非常显着性差异（P<0.01），奥美拉唑组结合位点数与正常组比较升高，有显着性差异（P<0.05）。溃疡模型组大鼠胃液总酸度较正常对照组明显升高（P <0.01），壁细胞H+，K+-ATP酶活性亦明显升高（P<0.01）；奥美拉唑组大鼠胃液总酸度较正常对照组降低（P<0.05），壁细胞H+，K+-ATP酶活性亦下降（P<0.05）；健脾活血组大鼠胃液总酸度较正常对照组升高（P<0.05），壁细胞H+，K+-ATP酶活性亦升高（P<0.05）；中西治疗组与正常组比较，其总酸度及H+，K+-ATP酶活性无明显差异（P>0.05）。