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广西桂郁金(GGYJ)抗免疫性肝损伤作用观察-本科护理论文题目

时间:2012-06-27 11:13来源:作者:点击:
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  肝脏是含酶丰富的脏器,在肝脏出现组织损伤或细胞破坏、坏死时,酶从细胞内逸出进入血液。因此,血清ALT,AST的升高是肝损伤的重要标志。肝脏是合成蛋白质的重要场所,在蛋白质代谢中起着重要的作用,肝功能受损可以使蛋白质的合成、细胞内运输和释放发生障碍,从而导致血清ALB减少,GLO升高,A/G比值降低。MDA是脂质过氧化的最终产物,其含量与脂质过氧化反应呈正比;而作为抗氧化酶系统主要物质之一的SOD含量的高低反映了机体清除氧自由基的能力。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解的酶,一般认为它在细胞内能清除有害的过氧化物代谢产物,阻断脂质过氧化链锁反应,从而起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。
  1  材料与仪器
  1.1  动物清洁级昆明种小鼠72只, 体质量(20±2)g,雌雄各半,由广西医科大学实验动物中心提供,动物许可证号:SCXK 桂 2003-0003。
  1.2  药材GGYJ:采集于广西玉林,经广西中医学院中药鉴定学教研室蔡毅教授鉴定为姜科植物广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C. F. Liang的块根。取GGYJ药材分别加12倍、10倍量水提取2次,第1次2h,第2次1.5h,提取液经过滤、合并、浓缩成可供小鼠灌胃的最大浓度的稠膏,相当于3.4g生药/ml。
  1.3  试剂BCG:中国生物技术集团公司上海生物制品研究所生产,批号:2004060501;大肠杆菌LPS:Sigma公司产品,进口分装;联苯双酯(BPD):广州市星群药业有限公司,批号: 20050422;ALT、AST测定试剂盒,南京建成生物工程研究所,批号:050423;SOD、MDA、GSH-Px:南京建成生物工程研究所,批号:050606。
  1.4  仪器半自动生化分析仪(德国),型号Chem300;高速低温离心机(德国),Biofuge stratos;超声波细胞粉碎机,宁波新芝科器研究院,型号JY92-2D;Agilent8453紫外可见分光光度计;722-紫外光栅分光光度计,上海第三分析仪器厂。
  2  方法
  2.1  分组动物随机分为6组,即空白对照组,模型对照组,BPD对照组(研末,以蒸馏水配成一定浓度的混悬液,剂量为600 mg/kg),GGYJ高、中、低剂量组(28,14,7g/kg),每组12只。各组按体重分别以0.2 ml/10g剂量给药,1次/d,连续给药12 d。
  2.2  造模给药第1天造模,除空白对照组外,其余5组小鼠均尾静脉注射BCG溶液(用生理盐水配置BCG溶液,使每ml约含108个活菌)0.2ml/只。12 d后经尾静脉注射7.5μg LPS生理盐水溶液,空白对照组同法给予等量的生理盐水,禁食(自由饮水)10 h后各组经眼球后静脉丛取血,常规分离血清。然后处死小鼠,取肝脏,用生理盐水配10%肝组织,用超声波细胞粉碎机匀浆,低温离心,按试剂盒说明书所述方法检测血清ALT、AST的含量(赖氏法),按试剂盒说明书所述方法用Agilent8453紫外可见分光光度计测定肝匀浆中SOD,MDA,GSH-Px的含量。
  3  实验结果
  表1显示,与空白组相比较,模型组血清ALT、AST水平升高, P<0.01,说明模型建立成功。与模型组比较,BPD组及GGYJ高、中剂量组均能非常显着地降低小鼠血清中升高的ALT水平( P<0.01);GGYJ低剂量组则显示无效;在降低小鼠血清ALT水平上,GGYJ高剂量组与BPD组作用相当;而GGYJ中、低剂量组的作用弱于BPD组与GGYJ高剂量组(P<0.01,P<0.05);GGYJ中、低剂量组与高剂量组之间降低ALT水平的作用存在量效关系。与模型组比较,BPD组、GGYJ高、中剂量组均能显着降低小鼠血清中AST的水平(P<0.01,P<0.05),GGYJ低剂量组则显示无效;GGYJ高、中剂量组降低小鼠血清AST水平的作用与BPD组相当;而GGYJ高、中剂量组组间比较无统计学意义,GGYJ低剂量组与高剂量组之间存在量效关系。
  表2显示,与空白组比较,模型组ALB含量明显降低(P﹤0.01),各给药组均能明显提高ALB含量(P﹤0.01),其中GGYJ高剂量组已经接近正常组水平。与空白组比较,模型组动物血清中GLO含量明显升高(P﹤0.01),GGYJ高剂量组GLO含量无明显变化,与空白组相近;BPD组与GGYJ中、低剂量组GLO含量也升高,但不及模型组;而各给药组均能明显提高A/G比值,GGYJ高、中剂量组有非常显着性意义(P﹤0.01),低剂量组有显着性意义(P﹤0.05)。
  表3显示,与空白组比较,模型组、BPD组、GGYJ高、中、低剂量组肝匀浆SOD、GSH-PX水平显着降低(P<0.01),MDA水平显着增高(P<0.01)。BPD组、GGYJ高、中、低剂量组均能升高模型小鼠肝匀浆SOD、GSH-Px的水平(P<0.01),降低MDA的水平(P<0.01)。GGYJ高、中剂量组升高SOD的作用与BPD组相近,GGYJ低剂量组的作用不及BPD组(P<0.01);GGYJ高、中、低剂量组在升高小鼠肝匀浆SOD水平方面呈一定的量效关系。GGYJ高剂量组降低MDA水平、升高GSH-Px的水平的作用与BPD组相近,GGYJ中、低剂量组的作用不及BPD组(P<0.01);GGYJ高剂量组与中、低剂量组在降低MDA水平方面有量效关系(P<0.05),GGYJ高、低剂量组之间在升高GSH-Px的水平方面存在量效关系(P<0.05)。给小鼠注射BCG可使巨噬细胞和中性多核粒细胞聚集于肝脏,使肝脏处于致敏状态,继而用低毒剂量的LPS攻击,可激发这些细胞释放对肝细胞有毒性的可溶性因子,造成免疫性肝损伤[7]。
      
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