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利用指纹图谱技术研究中药急性子的药性成分研究-股骨骨折的护理

时间:2014-04-24 14:46来源:作者:点击:
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  1  仪器、试剂与药材
  美国Agillent 1100 高效液相色谱仪,二级阵列检测器。乙腈为色谱纯,水为娃哈哈纯净水。8批样品分别为山东、河南、西安、湖北、安徽、沈阳、四川、北京的药材,药材来源见表1。表1  急性子药材来源(略)
  2   方法
  2.1  色谱条件色谱柱为迪马公司C18(4.6 mm×200 mm);流动相: 0.1%甲酸(A)- 乙腈(B),梯度洗脱程序为(B);0~15 min,25 %~90 %;15~20 min,90%,20.01~25 min,25%。体积流量为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为260 nm。
  2.2  供试品溶液制备取急性子药材粉末1.0 g,精密称定,置三角瓶中,精密加入甲醇20 ml,称重,过滤,超声提取20 min,取出,放凉,称重(必要时补足所失重量,摇匀),滤过,取续滤液经微孔滤膜滤过,溶液备用。
  2.3  测定方法分别精密吸取不同地区(山东,河南,西安,湖北,安徽,沈阳,四川,北京)的急性子药材试品溶液5 μl,注入高效液相色谱仪,记录25 min 的色谱图即得。供试品色谱图中,以色谱峰(S峰)的保留时间和峰面积为参照,计算各指纹峰的相对保留时间和峰面积比值。
  2.4  分析时间考察吸取供试品溶液S6溶液5 μl,注入高效液相色谱仪,运行55 min,记录色谱图,发现25 min以后已无明显色谱峰,因此分析时间定为25 min。
  3  结果与分析
  3.1  指纹图谱及技术参数[2]
  3.1.1  共有峰的标定本实验以急性子的急黄新苷色谱峰为参照,确定其相对保留时间为1,计算其他主要色谱峰的相对保留时间,标定出13 个共有峰,结果见表2,指纹图谱见图1。
  3.1.2  共有峰面积比值  以急黄新苷面积作为1,计算各共有指纹的相对峰面积,结果各相对峰面积差异较大,表明不同地区的药材质量之间存在较大的差别。
  3.1.3  谱峰匹配  本实验根据样品相对保留时间,结合样品指纹图谱的谱峰形状特点对标定的共有峰进行匹配。结果所标定13个共有峰匹配无误,见图2。
  急性子的指纹图谱的建立、分析与评价 对8份急性子供试品的色谱分离图进行叠加比较可以看出,8份急性子的供试品HPLC指纹图谱具有较高的一致性,它们可作为鉴别急性子的必要条件之一。由表2可以看出13个峰相对峰面积相差较大,说明其生长条件不同;相同化学成分的含量有所不同,即药材质量间存在一定的差异,因此对不同的急性子供试品共有指纹峰的相对面积进行比较,可以鉴别不同来源急性子的质量。采用HPLC法分别建立药材HPLC-紫外指纹图谱,方法简单,重复性好,检测灵敏度高。
        
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