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　　1  仪器与试药
　　日本岛津LC-10AT VP高效液相色谱仪,日立ALLTECH ELSD2000型蒸发光散射检测器,SPD-10AT VP型自动进样器。黄芪甲苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号110781-200512；规格：20 mg,供含量测定用)。醒脑再造胶囊由吉林华侨药业股份有限公司提供(批号20060903、20061010、20061221)。乙腈为色谱纯,水为纯化水,其他试剂均为分析纯。
　　2  方法与结果
　　2.1  色谱条件
　　色谱柱：Phenomenex Gemini C18(250 mm×4.60 mm,5 μm),流动相：乙腈-水(36∶64)；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；日立ALLTECH ELSD2000型蒸发光散射检测器,漂移管温度：105 ℃；载气流速：2.7 L/min[3]；理论塔板数以黄芪甲苷峰计算应不低于4 000,分离度(R)＞1.5。
　　2.3  供试品溶液的制备
　　取装量差异项下的本品,混匀,研细,取约0.7 g,置索氏提取器中,加甲醇适量,冷浸过夜,再加甲醇适量,加热回流4 h。提取液回收甲醇并浓缩至干,残渣加水10 mL,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次40 mL。合并正丁醇提取液,用氨试液充分洗涤2次,每次40 mL。弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水10 mL使溶解,放冷。通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5 cm,长12 cm),以水50 mL洗脱,弃去水液,再用40%乙醇30 mL洗脱,弃去洗脱液,继用70%乙醇80 mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶内,加甲醇至刻度,摇匀,即得。黄芪甲苷对照品、样品和阴性对照色谱图见图1。
　　2.4  线性关系考察
　　精密称取黄芪甲苷对照品的甲醇溶液(0.097 2 mg/mL),分别精密吸取5、10、15、20、25 μL测定,以对照品质量的自然对数为横坐标,以峰面积的自然对数为纵坐标,绘制标准曲线。结果表明,黄芪甲苷在0.486～2.43 μg范围内线性关系良好,其线性对数方程为：Y＝1.952 6X＋13.628 6(r＝0.999 7)。
　　2.5  试验
　　取醒脑再造胶囊(批号20060903),按“2.3”项下方法制备供试品溶液,分别于配制后0、2、4、8、12、24 h精密吸取样品溶液20 μL,注入液相色谱仪,测定峰面积。结果表明,黄芪甲苷在24 h内基本稳定,RSD＝1.0%。精密吸取供试液20 μL,注入液相色谱仪,重复进样6次,结果RSD＝0.6%。分别取同一批样品6份,按“2.3”项下方法制备供试液,测定,含量为0.203 7 mg/粒,结果RSD＝1.1%。精密称取已知含量的同批供试品(批号20060903,含量为0.203 7 mg/粒)6份,分别精密加入对照品溶液(0.101 6 mg/mL) 2.0 mL,依法测定,计算平均回收率为100.5%,RSD＝0.3%,结果见表1。
　　在色谱条件的选择过程中,曾对乙腈-水(32∶68)、乙腈-水(34∶66)、乙腈-水(36∶64)流动相做了系列比较,结果表明,采用乙腈-水(36∶64)作为流动相系统分离效果好,峰形对称,保留时间适宜,杂质峰达到基线分离,阴性无干扰,因此,本试验采用乙腈-水(36∶64)作为流动相。不同的样品需要不同的条件,蒸发光散射检测器的载气流速和漂移管温度对结果影响比较大,是影响本试验结果的重要参数,本试验选择的条件可获得理想的信噪比和基线。