妇科超声论文    妇科护理论文   妇科论文发表     妇产科论文发表
1  仪器与试药
　　1.1  仪器Agilentl100高效液相色谱仪，Alhech2000型蒸发光散射检测器，Agilent ChemSation for LC and LC／MS systems色谱工作站；BP一211D型电子分析天平（德国Satoritxs公司）。
　　1.2试药
　　1.2.1  健肾解毒腹膜透析液（Ⅲ）的制备先将黄芪、丹参、大黄3种药材分别用煎煮、柱层析、有机溶剂提取等提取分离方法制备成各自的中间体，再将3种药材中间体按一定比例加入其他药物制备成健肾解毒腹膜透析液制剂［2］。
　　1.2.2  其他试药黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0781—200311）；乙腈（色谱纯，Merck公司）；重蒸馏水；其余试剂均为分析纯。
　　2  方法与结果
　　2.1  色谱条件Li Chro CART HPLC-Kartusche RP-18e色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相 A-乙腈，B-水，梯度洗脱（见表1）。流速 0.80 ml/min，进样量20 μl，柱温 25℃，ELSD参数漂移管温度106℃， 氮气流速3.00 ml/min，理论板数以黄芪甲苷计算不低于4 000。
　　2.2  参照物峰的选择与参照物溶液的制备因黄芪甲苷为有效部位指标性成分，且在HPLC指纹图谱中黄芪甲苷的色谱峰面积较大、稳定，故选择黄芪甲苷的色谱峰为参照物峰［3］，计算其它色谱峰的相对保留时间和相对峰面积。精密称取黄芪甲苷对照品10.03 mg,置于10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每毫升含黄芪甲苷1.003 mg的参照物溶液。
　　2.3  供试品溶液和阴性对照溶液的制备与测定按处方精密称取JSPDS（Ⅲ）冻干粉适量，加水适量溶解并稀释，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液（2 g／L），同法制得阴性对照溶液。分别吸取供试品溶液、参照物溶液及阴性对照溶液各20 μl，注入高效液相色谱仪，记录60 min色谱图，阴性对照溶液的色谱图无干扰。
　　2.4  方法学考察
　　2.4.1  精密度实验 取JSPDS（Ⅲ）同一供试品溶液，连续注入高效液相色谱仪5次，考察各色谱峰相对保留时间和峰面积比值的一致性。实验结果表明，各色谱峰相对保留时间和峰面积比值的RSD均小于3％ ，精密度良好，符合指纹图谱规定要求［4］。
　　2.4.2  重复性实验取同一批JSPDS（Ⅲ）分别制备供试品溶液6份，分别注入高效液相色谱仪，考察各色谱峰相对保留时间、峰面积比值的一致性。实验结果表明，各色谱峰相对保留时间和峰面积比值的RSD均小于3％，重复性良好，符合指纹图谱规定要求。
　　2.4.3  稳定性实验取同一JSPDS（Ⅲ）供试品溶液，分别在0，2，4，8，16 h时，室温（25℃）下检测，考察各色谱峰相对保留时间、峰面积比值的一致性。实验结果表明，JSPDS（Ⅲ）供试品溶液16 h内，各色谱峰相对保留时间和峰面积比值的RSD均小于3％ ，稳定性良好，符合指纹图谱规定要求。
　　2.5  10批JSPDS（Ⅲ）试品指纹图谱根据10批JSPDS（Ⅲ）试品的检测结果，比较其特征色谱图（见图1），确定各批JSPDS（Ⅲ）共有的、相对稳定的7个色谱峰为共有峰，10批试品相对保留时间（见表2）。
　　共考察10批JSPDS（Ⅲ）成品指纹图谱，选择7个色谱峰为共有峰，其保留时间（峰号）分别约为1.484 min（1），4.420 min（2），12.154 min（3），12.983 min（4），15.353 min（5），16.847 min（6），27.719 min（7，S）。其中，黄芪甲苷为7号峰，为S峰。测试条件下，l0批JSPDS（Ⅲ）供试品检测结果表明：主要共有峰面积比值为2∶3∶4∶5∶6∶7（S）=（0.210～0.39）∶（0.272～0.504）∶（0.137～0.255）∶（0.130～0.242）∶（0.0826～0.153）∶（1.000）。共有峰面积占总峰面积比值（见表3）均大于95％，非共有峰面积占总峰面积比值均小于5％ ，符合指纹图谱规定要求［5］。