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　　1  仪器与试药
　　日本岛津LC-10 AT高效液相色谱仪,SPD-10A紫外检测器,KQ-250型超声波处理器。葛根素对照品购于中国药品生物制品检定所(批号0537-9910,HPLC面积归一化法,测定含量为99.26%)；降脂减肥颗粒(6 g/袋)由吉林森工健今药业有限公司提供。其它化学试剂均为国产,AR级。
　　2  方法与结果
　　2.1  色谱条件[1]
　　色谱柱：Diamonsil-C18柱(5 μm,4.6 mm×150 mm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7)；流速：0.9 mL/min；紫外检测波长：250 nm；理论塔板数按葛根素计算,不低于3 000；柱温为室温。
　　2.2  对照品溶液的制备
　　精密称取葛根素对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.05 mg的溶液,摇匀,作为对照品溶液。
　　2.3  供试品溶液的制备
　　取本品20 g,研细,取1 g,精密称定,加入30%乙醇30 mL,置具塞锥形瓶中,称定重量,超声处理20 min,放冷,再称定重量,以30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
　　2.4  阴性对照溶液的制备
　　按处方量制备不含葛根药材的阴性样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL,注入液相色谱仪中,按上述条件测定。结果表明,阴性对照溶液色谱图中与对照品位置处无干扰,此法可行(见图1)。
　　2.5  线性关系考察
　　精密吸取葛根素对照品溶液4、8、12、16、20 μL,分别注入高效液相色谱仪中进行分析。以对照品进样量(μg)为横坐标,以对照品的峰面积为纵坐标作图,得一条通过原点的直线,回归方程为：Y＝2 490 376.534X＋19 847.951,r＝0.999 6。结果表明,葛根素在0.114～0.570 μg间呈良好的线性关系。
　　2.6  精密度试验
　　精密吸取供试品溶液连续5次重复进样,测得相对偏差RSD＝0.53%。
　　2.7  稳定性试验
　　精密吸取供试品溶液在0、2、4、8 h分别进样,结果葛根素峰面积的RSD＝0.24%,表明在8 h内供试品溶液的葛根素含量稳定。精密称取葛根素对照品适量,加入已测葛根素含量的降脂减肥颗粒样品(取约1.0 g,精密称定)中,置具塞锥形瓶中,精密加30%乙醇100 mL,按供试品溶液的制备方法制备,进样,测定,计算回收率。结果见表1。表1  回收率试验测定结
　　3  结果
　　根据葛根素的溶解性,分别以乙醇、30%乙醇为提取溶媒进行试验,结果表明,以30%乙醇提取制备供试品溶液能使葛根素提取完全,以甲醇为溶媒制备的溶液中杂质峰较少,含量偏低,故选择以30%乙醇为溶媒制备供试品溶液。有关葛根素的高效液相色谱法含量测定方法较多,流动相有采用乙腈、甲醇、水、冰醋酸等系统[2]。我们采用甲醇、水系统,色谱分离效果较为满意,分离度及峰形对称性较好。