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　　1  仪器与试药
　　Q/YYX1030-82型电热手提式压力灭菌器；101-2s电热恒温鼓风干燥箱；DHP781型恒温培养箱；SPX-250C型恒温恒湿培养箱；SPX-103型净化工作台；漩涡混合器；CSY-Ⅱ型不锈钢电热恒温水浴锅（北京医疗设备厂）。
　　菌种：大肠埃希菌[CMCC（B）44102]；金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]；枯草芽孢杆菌 [CMCC（B）63501]；白色念珠菌[CMCC（F）98001]；黑曲霉菌[CMCC（F）98003]。营养琼脂培养基；玫瑰红钠琼脂培养基；胆盐乳糖增菌培养基；改良马丁琼脂培养基；MUG快检试剂；蛋白胨。其他试剂均为分析纯。pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲溶液，照2005年版《中华人民共和国药典》（一部）配制。试验样品：滋阴明目丸。
　　2  实验方法与结果
　　2.1  菌液制备
　　取经37 ℃培养18～24 h的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌与枯草芽孢杆菌3种菌种，分别接种于10 mL营养肉汤中，置37 ℃培养箱中接着18～24 h,用0.9%灭菌氯化钠溶液稀释至1O-5～1O-7约为5O～100 cfu,备用。取白色念珠菌接种于10 mL改良马丁培养基中，置23～28 ℃培养18～24 h,用0.9%灭菌氯化钠溶液稀释至1O-5～1O-7约为5O～100 cfu,备用。
　　2.2  细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证
　　试验组：取供试液1 mL和5O～100 cfu试验菌，分别注入平皿中，每株菌平行制备2个平皿。菌液组：测定所加的试验菌数。供试品对照组：取供试液注入平皿中，测定供试品本底菌数。稀释剂对照组：取稀释剂和5O～100 cfu试验菌，分别注入平皿中，测定每株平行制备2个平皿。表1结果表明，3次平行试验，滋阴明目丸5株菌的回收率均大于7O%,表明滋阴明目丸按常规法进行细菌、霉菌及酵母菌计数，经方法学验证试验成立。
　　2.3  大肠菌群的验证试验
　　试验组：取1∶10、1∶100的供试液1 mL,分别接入10 mL胆盐乳糖发酵培养基中，分别加入大肠埃希菌混悬液1 mL, 30～35 ℃培养24 h,观察结果。阴性对照组：除菌液为金黄色葡萄球菌1 mL,方法同试验组。阳性对照组：除不加供试液，其他操作同试验组。
　　2.4  控制菌验证试验
　　试验组：取批号为060402的1∶10供试液10 mL,加入大肠埃希菌液1 mL,接入100 mL胆盐乳糖培养基中，35 ℃培养24 h；取上述培养物0.2 mL,接种至5 mL MUG培养基的试管中，35 ℃培养24 h；观察后，沿管壁加入数滴靛基质试液，观察结果。阴性菌对照组：除菌液为金黄色葡萄球菌1 mL,方法同试验组。阳性对照组：除不加供试液，其他操作同试验组。滋阴明目丸3次平行试验，试验组都检出大肠埃希菌，阴性菌对照组都未检出金黄色葡萄球菌，表明滋阴明目丸的控制菌检查方法按常规法，经方法学验证试验成立。
　　2.5  样品检验结果
　　取滋阴明目丸3批供试品（070305、070419、070821）稀释液按常规法进行细菌、霉菌及酵母菌计数、控制菌检查，经检验符合规定。采用常规法检查滋阴明目丸的细菌、霉菌及酵母菌，回收率显示，本品对大肠埃希菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉均无抑制性。采用常规法检查滋阴明目丸的控制菌，结果符合药典规定。