创伤失血性休克是一种常见的临床急危重症，对未控制出血的创伤休克患者行限制性液体复苏的观点已被人们所接受。另外，抗炎性介质、抗氧自由基、抗内毒素等为辅的综合治疗也显现较好的临床应用前景 。研究发现，血必净注射液能在体内有效拮抗内毒素，阻止多种炎性介质释放，提高超氧化物歧化酶活性等作用，可恢复受到抑制的免疫反应，改善微循环，保护和修复应激状态下受损的脏器。本实验采用放血法建立失血未控制性休克兔模型，研究血必净注射液对限制性液体复苏时失血量及复苏液体量的影响，探讨血必净注射液在创伤失血洼休克治疗中的作用。
1 材料与方法
1．1 实验动物健康新西兰兔32只( 埠医学院实验动物中心提供)，月龄5个月左右，重2．0～2．5 ，雌雄不拘，术前自由进食和饮 。
1．2 主要设备及试剂 MedLeb生物信号采集处理系统(南京美易科技有限公司)；微量注射泵WZ60C6(浙江史密斯医学仪器有限公司)；乳酸林格液(安徽环球药业股份有限公司，批号AO90606B)；血必净注射液(天津红日药业股份有限公司)；血液保存液Ⅱ(四川南格尔生物医学股份有限公司，批号090219)等。
1．3 动物模型制备经兔耳缘静脉缓慢推注20％氨基甲酸乙酯(5 ml／kg)麻醉后气管插管。经左颈总动脉插入内径约2 him硅胶管(导管的垂直重力水滴速为200滴／分)，连接MedLeb生物信号采集处理系统连续监测动脉血压。经右颈外静脉连接输液泵用于实验中输液。经右侧股动脉插入内径约2 mm硅胶管，抽血制作休克模型和采集血样；左侧股动脉插入自制硅胶管(导管的垂直重力水滴速为120滴／分)，收集活动性出血。上述操作完成并稳定10 rain后，记录血压及抽取血样作为基线参数。
采刚股动脉放血法制作出血未控制性休克模型，通过右侧股动脉导管匀速缓慢抽取血液(2 m1．kg～min )，首先以2 ml-kg～速度快速抽总血量的10％ ，观察5 rain；以后每隔3 rain以2 ml·kg～ ·min 的速度抽取总血量的5％ ，共计抽血4次，使抽血量达到总血量的25％。
使平均动脉血压(nlean a~erial pressure，MAP)在20 rain内缓慢降至40 mmHg，使实验动物进入中度休克状态，停止抽血，记为0时相。将股动脉放出的血保存在有血液储存液的50 ml一次性注射器备血液回输。通过反复少量、缓慢抽血、输血，使MAP在40 mmHg水平维持30 rain。开放左股动脉导管使血液流入储血瓶中，测量活动性出血的量。有活动性出血的失血性休克模型制作完毕。
1．4 动物分组实验动物随机分为3组。XB组：
限制复苏期予以血必净注射液(4 ml／kg)联合乳酸林格液行限制性复苏。LRS组：限制复苏期予以乳酸林格液行限制性复苏。NRC组为正常对照组限制复苏期不予以液体复苏，在相应时间点抽取血样本并回输相同量血液，观测至动物死亡(以心电图平直为准)。
1．5 实验分期实验过程分4期：失血休克期(0—30 min)，MAP在40 mmHg维持30 min。限制复苏期(30～90 min)，失血休克期后，经输液泵行限制性液体复苏(速度为2 ml·kg ·min )，10 rain内使MAP达到60 mmHg并维持。止血复苏期(90—210 rain)，关闭左股动脉导管止血。经右颈外静脉回输自身出血量的1／2和林格液，通过控制输入液体的速度使MAP在20 rain内达到80 mmHg并维持。院内观察期(210～390 min)，停止补液，观察动物存活情况。
1．6 观察指标
1．6．1 出血量 由右股动脉导管抽取的血液和左股动脉活动性出血量(失血休克期抽血量+限制复苏期活动出血量)相加所得。全身总血容量按体重的5．73％ 计算。
1．6．2 输液量应用微量输液泵进行液体输注，开始设置速度2 ml·kg·min～根据实际血压和目标血压选择加快或减慢输液速度。分别记录限制复苏期的输液量和止血复苏期输液量。
1．6．3 红细胞压积(HCT) 于休克模型制作成功后的0、30、90、210、390 ，min各抽取0．5 ml动脉血做HCT，每次抽取血样后，立即回输同体积自体血液加以补充。
1．6．4 存活时间 记录制备模型到动物死亡的时间。
1．6．5 存活率由以下公式得出：存活率=某一时间点某组尚存活的兔／同组兔数×100％ 。
1．7 统计学方法 采用t检验、方差分析和q检验。
2 结果
2．1 实验兔子基础情况比较3组实验兔子月龄、体重和基础血压差异均无统计学意义(P>0．05)2．2 实验兔子存活情况XBJ组和LRS组兔子均成活。NRC组兔子最早于113 min死亡，最迟于190 min死亡，存活时间为(152．8±23．3)min，死亡率100％ 。
2．3 兔子活动性出血量、限制复苏期补液量和止血复苏期补液量比较NRC组为正常对照组，不存在活动性失血也不进行补液，故其活动性出血量、限制复苏期补液量和止血复苏期补液量均为无数据；NRC组未进行补液复苏，因而其补液量未予列出。
3组活动性出血量差异有统计学意义(P<0．01)(见表2)。在限制复苏期和止血复苏期的补液量上，xBJ绀均较LRC组明显减少(P<0．01)(见表3)。
2．4 HCT比较3组HCT基础值差异无统计学意义(P>0．05)。NRC组兔子未成活至210 min，故表中未列出该组在210 min和390 min时问点的数据。XB组在复苏后各点HCT均高于LRS组(P<0．01)(见表4)。
3 讨论
3．1 限制性输液联合血必净注射液对兔失血量影响 注射液控制出血前大量液体复苏可造成失血加速、血液过度稀释，引起组织缺血缺氧、酸中毒和稀释性凝血功能障碍。且大量的液体输入会机械性破坏已形成的血凝块并使之脱落，增加活动性出血量；另可加重组织缺血一再灌注损伤，激活炎症免疫反应，从而导致病死率增加。研究 表明，对于创伤所致的非控制性失血性休克，在手术彻底止血前不宜给予大量的液体输入，而是应该限制液体的输入量，只是维持机体的基本需求，在彻底止血后再进行大量的液体复苏，被称作限制性液体复苏。研究发现，限制性输液可以加速体内小血栓的形成，可以减少非控制性失血量及总输液量。另外，IJi等 发现限制性液体复苏的平均动脉压在50～60 mmHg，限制行复苏的时间不应超过90 min，出血量和输液量。原因可能是：(1)在限制性液体复苏的基础上，应用血必净注射液可进一步减少液体输入量。避免大量液体输入所致的凝血块脱落、稀释性凝血功能障碍而引起出血量增加。(2)血必净注射液中含有的红花黄色素A、以降低心肌细胞内ca 含量，防止ca内流造成的细胞内外离子不平衡分布，从而有效地保护心肌细胞膜的完整性，改善心肌营养性血流量，减轻心肌细胞的损害，心脏的泵血功能得以维持。因此，应用血必净注射液进行复苏，可以在补液量较少情况下维持血压的稳定和供氧的相对平衡.(3)全身缺血一再灌注过程可导致血管内皮细胞功能改变甚至损伤，使细胞间隙明显增大，通透性增加，从而使输入的液体随血浆成分进入组织问隙，导致组织水肿。
血必净注射液中的红花黄色素A、川芎嗪、阿魏酸、丹参素等具有抗脂质氧化、抑制细胞内钙的升高，从而阻止钙超载对凋亡调控基因的促发，发挥对血管内皮细胞的保护作用，减轻血管通透性，减少液休向组织问隙流动，从而减少液体输入量，减轻组 水肿及缺血一再灌注损伤。
3．2 限制性复苏联合血必净注射液对CT的影响创伤失血性休克后全身血容量的降低，机体会启动血容量代偿机制，通过儿茶酚胺的释放调节毛细血管前后阻力，促使组织液回流进入血管，造成血液稀释。另外，休克后的晶体液复苏也可造成血液的稀释，引起HCT的进一步下降。由于HCT是影响血液黏度的重要因素，它的减低必然引起血液黏度下降。以往理论认为血液黏度下降叮使血流阻力减低、组织灌注量，补偿了血液携氧能力降低，防止了血红蛋白的浓度减低和携氧减少所致的缺氧。
另外，HCT下降使血红蛋白氧离曲线右移，血红蛋白更易于释出氧供组织所需，组织供养仍充分。但是，近年研究注意到壁切应力等于液豁度和壁切变率的乘积，血液黏度下降会引起壁切应力降低，同时引起内皮细胞减少一氧化氮释放，从而引起微动脉收缩，灌流压下降，出现毛细血管塌陷，加重出血及全身性水肿等不良影响，影响治愈率。
本研究结果显示，XBJ组动物在复苏后各时间点HCT均高于LRS组。我们认为这可能是因为血必净注射液通过降低总输液量，减轻了血液过度稀释和HCT的下降，提高了血液携氧能力，从而改善休克机体的微循环，有利于纠正休克机体的缺氧状态，提高救治成功率。
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