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1  仪器与材料
　　高效液相色谱仪（Agilent 1100高效液相色谱仪、二极管阵列检测器、原装色谱工作站）；色谱柱：DiamonsilTM（钻石）C18 （250 mm×4.6 mm, 5 μm）；PHS2-3C型精密pH计（上海雷磁仪器厂）；AUW220D电子分析天平（岛津）；RE-52A型旋转蒸发仪（上海亚荣）；ES-315 TOMY高压蒸气灭菌锅（基因公司）；BCN-1360B生物洁净工作台（广东半球仪器厂）；GNP-9000系列生化培养箱（嘉兴中新医疗仪器公司）。
　　2  方法
　　2.1  分析方法确立
　　2.1.1 干浸膏得率干浸膏得率（%）=干浸膏质量八爪金龙粉末质量×100%
　　2.1.2   岩白菜素含量测定
　　色谱条件［7］：色谱柱为DiamonsilTM（钻石）C18 （250 mm×4.6 mm, 5 μm）；流动相为甲醇-水（25∶75），检测波长275 nm，流速1 ml·min-1。每次进样之前用流动相平衡10 min。按该色谱条件下理论板数以岩白菜素峰计算不低于2 900，分离度不低于1.5。对照品及样品谱图见图1～4。
　　对照品溶液及标准曲线的制备：精密称取岩白菜素对照品并用甲醇溶解、配成1.0 mg/ml的对照品溶液。将对照品溶液依次配成0.05，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mg/ml的混合溶液。依次精密吸取10 μl进行分析。以岩白菜素的进样量（μg）为横坐标， 峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y= 54.34X +1.65，（r=0.999 2），表明岩白菜素的进样量在0.5～10 μg成良好线性关系。
　　样品溶液的制备：精密称取八爪金龙样品0.1 g，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇25 ml , 称定重量，超声处理30 min，放冷，用甲醇补足重量，摇匀，微孔滤膜（0.45 μm）过滤，即得，避光保存。
　　精密度实验：精密吸取质量浓度为1.0 mg/ml的对照品溶液10 μl，重复进样5次，RSD为1.97 % （n=5），表明精密度较好。
　　稳定性实验：取同一份样品溶液，分别在0，4，8，10 h进样，岩白菜素含量RSD为2.16 %，表明样品至少在10 h内稳定。
　　重复性实验：取同一份样品，精密称量，按“样品溶液的制备”方法制备样品溶液5份，分别进样，测定岩白菜素含量，RSD分别为2.24 % （n=5），表明重复性良好。
　　23  SBE工艺的均匀设计优选及结果
　　2.3.1  实验设计与安排根据SBE理论方法［6］，在药材粒度、煎煮加水量（8，8，6倍）、煎煮温度及次数、过滤、浓缩等条件相同的前提下，确定考察的因素和水平。根据预实验的结果及仿生学原理，人体胃、小肠、大肠的体液酸度最佳pH分别为2.0，7.5，8.3，以岩白菜素、干浸膏得率的标准化处理结果为考察指标，使用数理统计软件DPS 7.55安排混合水平均匀设计表［U9（9×33），中心化偏差CD=0.2072］安排实验（见表1）。其结果及数据分析（见表2）。每次称取30 g八爪金龙粗粉两份，其余处理同上。
　　2.3.2  工艺条件的优化为体现中药多成分、多途径、多靶点的作用特点［8］，以岩白菜素含量、HPLC总面积、干浸膏得率为指标，按公式X'i.j=（Xi.j-j）/Sj进行标准化处理［9］。Xi.j为样品中成分j的含量， j为9个水平样品液成分j的标准差， Sj为9个不同水平样品成分j的标准差。Xi.j为标准化值。根据各指标在提取工艺中的主次地位，给予不同的加权系数，以标准化值 加权后求和后得综合评价Y值（Y = 岩白菜素含量 × 7 + 干浸膏得率× 2 + HPLC总面积 × 1），并将Y值经DPS 7.55进行逐步回归分析，（见表2）。将表2内Y值（综合评判指标）进行线性回归处理，得回归方程：Y= -1 001.641 2 - 54.078 0X1 + 284.699 6X2 + 25.334 3X3 - 22.027 3X2 X2 + 12.149 1X1 X2 - 4.012 6X1 X3 - 1.875 4X2 X3，理论最大优化值为Y= 14.12。模型的复相关系数R=0.999 6，F=7 520.078 9，而F0.01（4, 4）＝15.98，因此该方程在α=0.01的水平上显着。因此，用该模型预测的工艺参数对八爪金龙的半仿生提取的影响是可行的。由方程得到的最优提取工艺条件是：第1,2,3次煎水pH值分别为2.02,6.54,9.00，总煎提时间为2.35 h。结合生产实际，确定其工艺条件为：第1次煎水用HCl调至2.0；第2,3次煎水pH分别为6.50，9.00；煎提总时间2.35 h，即依次为85，40，20 min。
　　2.3.3  优化条件验证分别取150 g八爪金龙粗粉3批，按优化后的条件进行提取，测得平均岩白菜素含量为10.87 mg/g，RSD：3.39%；平均HPLC总面积5 949，RSD：4.63 %；平均干浸膏得率32.37 %，RSD：4.94 %；Y=14.36，与回归模型预测值较为接近。
　　本文首先对八爪金龙半仿生提取工艺的优选，并将最佳工艺产物与醇提法、水提法产物的岩白菜素含量、HPLC总面积、干浸膏得率的综合评价指标及抑菌活性进行了比较。相对于传统水提工艺，半仿生提取工艺可有效降低浸膏得率，较传统水提工艺为佳。