1仪器与材料丹参酮ⅡA对照品(批号：110766—200619，购于中国药品生物制品检定所)；丹参(批号：1202031，购于四川新荷花中药饮片股份有限公司)。药材经检验符合《中国药典}2010年版标准。

　　高效液相色谱仪waters2695，waters2424蒸发光散射检测器；高速冷冻离心机(Eppendorf公司)；BS—I10S电子分析天平(北京赛多利斯电子天平有限公司)；HH—S6A恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司)；超声波清洁器(昆山市超声仪器有限公司)；旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；循环水真空泵2实验方法与结果2.1正交试验设计影响醇提效果的主要因素为醇浓度(A)、提取时间(B)、提取次数(C)。所以选用正交试验设计表试验，因素与水平。

　　2.2样品含量的测定

　　2.2.1色谱条件岛津LC.10AT二极管阵列检测器，色谱柱：，4.6mm×250.0mm×5.0m，柱温：35℃，流动相：甲醇一水(75：25)，流速：1.0mL／min，检测波长：270nm。

　　2.2.2标准曲线与线性精密称取丹参酮Ⅱ对照品5.0mg，加甲醇定容至5.0mL，再精密吸取1.0mL，加甲醇定容至100.0mL，即得0.01mg／mL的丹参酮Ⅱ对照品溶液。以对照品溶液1.0、4.0、7.0、10.0、13.0、16.0、20.0L进样，记录色谱图。

　　并以进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行线性回归。所得标准曲线：Y=8190602.5x7813.1，r=0.99986，说明丹参酮Ⅱ在0.01～0.20g线性关系良好。

　　2.2.3供试品溶液制备取本品粉末(过三号筛)约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50.0mL，称定重量，加热回流lh，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　2.2.4对照品溶液的制备取丹参酮Ⅱ对照品10.0mg，精密称定，置50.0mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2.0mL，置25.0mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1.0mL中含丹参酮ⅡA16.0g)。

　　2.2.5加样回收率实验分别精密称取已知量的供试品50.0mL共3份，分别精密加入2份丹参酮Ⅱ对照品溶液各3.0mL，按样品含量测定方法测定丹参酮Ⅱ含量，计算回收率，结果平均回收率为98.70％，RSD=0.52％。

　　2.3实验结果与分析

　　2.3.1提取工艺条件考察正交试验数据。

　　根据正交实验结果进行极差分析及方差分析，结果显示A、B均不具有显着性差异，C具有显着性差异。影响程度C>A>B，最佳工艺条件为A2BC3。

　　2.3.2重复性试验与结果对优选出来的方案进行验证试验，即同一方案做3次，看是否与原实验结果基本一致，结果见表5。从综合生产成本和节省资源考虑，提取时间的P>0.05，所以提取时间不是显着性因素，以降低成本角度看0.5h比1h经济，所以拟选择AB。C作为实施方案，并对其进行比较验证，结果见表6。试验结果表明，两个方案试验结果基本一致，并且第2个方案工艺稳定，为降低成本最后决定选择A：B，c，即最佳提取工艺为醇浓度为80％，提取3次，每次提取时间为0.5h。

　　3讨论

　　丹参药材中水溶及脂溶性成分都呈现显着药理作用，而脂溶性成分又以丹参酮Ⅱ为主要指标。

　　因此，在对丹参药材进行质量标准控制的时候，应对丹参酮Ⅱ含量进行含量控制。而丹参酮的不稳定性易对提取率造成极大影响。因此，提取中应选最佳提取试剂、控制好提取时间，以及回收条件，以达最大收率。

　　本研究主要通过正交实验来优选丹参药材中丹参酮Ⅱ的醇提工艺，考察了醇浓度、提取时间、提取次数对提取效果的影响。并以丹参酮Ⅱ的含量为质控指标，经正交试验设计筛选出最佳提取条件ABc，每次加醇浓度为80％，提取时间依次为每次0.5h，提取次数为3次。另外还对优选过的提取工艺进行了三批验证和优化验证，结果表明：该醇提工艺稳定性和重现性良好，科学、合理、可行。